胆道癌治疗新视角：遗传异质性、分子图谱及微环境调控

胆道癌（BTC）约占消化道肿瘤的 3%，其不同亚型在流行病学、自然史、临床表现、治疗反应及预后方面存在显著差异，可能与其胚胎发育来源不同有关。近年来，研究开始关注 BTC 的发育起源，认为从胚胎阶段理解胆道系统的形成，有助于解释其异质性特征，并基于此进行个体化治疗，而靶向治疗和免疫治疗的广泛应用，佐证了这一研究方向^[1]。由此可见，作为所有临床研究的基石，基础研究必须有一席之地。2026年4月22日，在圣地亚哥落幕的美国癌症研究协会（AACR）年会上，众多基础研究从另一个视角展现出胆道癌治疗的新希望。【ONCO 前沿】特此整理部分内容，以飨读者。

BTC 是一类具有遗传异质性和高度侵袭性的恶性肿瘤，由于发病隐匿、进展迅速，大多数在诊断时已处于局部晚期或转移性疾病阶段，因此，临床上亟待开发新的治疗策略。在多数上皮性肿瘤中，识别具有独特表达的细胞表面肿瘤相关抗原（TAA）具有重要意义，因为这些抗原可作为多种疗法的配体，包括 CAR-T 细胞治疗。然而，由于正常肝脏组织中亦有表达，限制了在 BTC 中识别 TAA 的研究。本文鉴定出细胞表面蛋白 TM4SF1（四次跨膜蛋白超家族）是一种潜在的 BTCTAA，可靶向用于 CAR-T 治疗。基于 TCGA 数据库分析发现，相较于正常肝/胆管组织，TM4SF1 在 BTC 中的 mRNA 表达水平上调。相应地，通过免疫组化证实，在原发性 BTC 组织中，TM4SF1 蛋白水平也存在上调。为验证 TM4SF1 可作为 BTC 中可靶向的 TAA，本研究证明靶向 TM4SF1 的 CAR-T 细胞在体外能对人源性 BTC 细胞系产生强效且剂量依赖性的生长抑制作用，并在异种移植的 BTC 细胞系小鼠模型中表现出显著的抗肿瘤活性。综上，该研究结果支持 TM4SF1 作为 BTC 中一种有前景的 TAA，可用于开发靶向 TM4SF1 的治疗手段（包括 CAR-T 细胞）。

ARID1A 是一种参与染色质重塑的抑癌基因，在多种癌症类型中的常见突变。在 BTC 中，ARID1A 突变的临床和基因组特征尚不明确。本研究旨在对比携带 ARID1A 突变（ARID1A-mut）与 ARID1A 野生型（ARID1A-wt）的 BTC 患者，在人口学、临床和分子特征方面的差异。

在连续纳入的 146 例接受分子谱分析的 BTC 回顾性队列中，共 27 例符合入组条件，14 例ARID1A-mut 和 13 例 ARID1A-wt。ARID1A-mut 组（对比 ARID1A-wt 组）以女性为主（77%vs46%；p=0.23）。中位年龄为 64 岁。原发肿瘤占比：肝内（76.9%）、肝门部（15.4%）和胆囊（7.7%）（p=1）。两组患者在确诊时疾病分期、体能状态及一线（1L）治疗方案方面具有可比性。ARID1A-mut 患者在一线治疗后达到部分缓解（PR）的比例呈升高趋势（53.9%vs30.1%；p=0.43）。一线治疗的中位无进展生存期（PFS）相似（11.4个月 vs9.3 个月；HR0.67，95%CI0.29-1.57；p=0.36），中位总生存期（OS）也相近（21.4个月 vs22.5 个月；HR1.47，95%CI0.51-4.28；p=0.48）。基因组图谱显示存在独特的伴随突变模式：在 ARID1A-mut 患者中，BAP1（28.6%vs0%；p=0.09）、IDH1（21.4%vs0%；p=0.22）和 PBRM1（28.6%vs7.7%；p=0.33）的共突变更为常见;而在 ARID1A-wt 队列中，TP53（38.5%vs28.6%；p=0.69）、KRAS（30.8%vs16.7%；p=0.38）和 DNMT3A（23.1%vs0%；p=0.09）的突变占优势。

结果显示，携带 ARID1A-mut 的胆道癌构成一个独特的分子亚型，其特征是部分缓解率呈改善趋势，并富集表观遗传相关的伴随突变。需要进行前瞻性验证以评估其预后及治疗意义。针对 ARID1A 突变的 BTC 的靶向治疗策略应在早期（I/II 期）临床试验中进一步探索。

目前对 BTC 遗传背景和分子谱尚缺乏深入了解。本研究通过全基因组分析阐明 BTC 的遗传多样性，并识别可作为新型诊断和治疗靶点的基因突变。本研究采用配对肿瘤组织和正常组织样本，对已接受手术的 7 例 BTC 患者进行全基因组测序。使用 snpEff 软件检测体细胞突变并进行注释。通过肿瘤图谱（Oncoplot）分析可视化突变累积模式，并评估其与淋巴结转移、血管侵犯、神经侵犯、门静脉侵犯及 IPNB 等临床因素的关联。

对检测出的体细胞突变进行分类注释后发现，基因间区突变最为常见（平均值：31,085，范围：26,588-39,135）。具有重要功能意义的突变包括：移码变异（平均值：16.7 个，范围：11-25 个）、剪接供体/受体变异（平均值：34.3 个，范围：17-45 个）以及获得终止密码子突变（平均值：7.4 个，范围：2-10 个）。此外，还识别出错义突变（平均值：529.4个，范围：363-647 个）。在同义突变中，错义突变是变异分类中最常见的类型；在变异类型中，单核苷酸多态性（SNP）最为常见。在单核苷酸变异（SNV）类别中，T 到 G 和 C 到 T 的转换检出率较高。在 7 例患者中有 3 例及以上共检出 30 个基因（包括 MUC16 和 MUC6）存在突变。对这些基因的肿瘤图谱分析提示，在无血管侵犯的样本中，突变累积范围更广，且与肿瘤突变负荷（TMB）相关。相比之下，在淋巴结转移、神经侵犯、门静脉侵犯或 IPNB 方面，未观察到明显的突变累积模式。在与癌症基因组图谱（TCGA）胆管癌数据库中登记的基因（331 个突变，涉及 321 个基因）进行比较时，本研究检出了 MUC16、OBSCN 和 TP53，但未观察到突变位点的重叠。这表明 BTC 具有极高的遗传异质性。

结果显示，BTC 以高突变负荷和遗传多样性为特征;血管侵犯状态与突变累积之间存在关联。基因谱分析所识别的基因突变可能成为新型诊断和治疗方法的潜在靶点。

慢性胰腺炎（CP）长期以来被认为是胰腺导管腺癌的危险因素，然而近期研究发现，胰腺炎患者发生胆道恶性肿瘤的风险同样升高。炎症被认为是胆管癌的重要诱发因素，但 CP 所构成的炎性微环境是否也参与了这一风险尚不明确，且这一关联的潜在机制及基因组相似性仍不清楚。为弥补这一知识空白，本研究对比了 CP 患者与远端胆管癌（dCCA）患者相对于正常健康个体的共有及特有的基因组特征。

研究对来自 3 例健康人、3 例 CP 患者和 2 例 dCCA 患者的胰腺或肿瘤标本进行了单细胞 RNA 测序（scRNA-seq）。在确定细胞类型身份并划分导管细胞亚群后，对三组患者的导管细胞进行了拷贝数变异推断以及在基因和通路水平上的功能扰动分析。

scRNA-seq 在三组患者共约 120,000 个细胞中鉴定出 35 个不同的细胞亚群，识别出 13 种细胞类型;进一步分析表明，导管细胞群可细分为两个具有不同基因组特征的细胞亚群。通过两种独立方法，在 dCCA 组的导管 A 亚群中发现了 1 号、7 号、11 号、12 号和 18 号染色体的扩增/重复。伪批量分析提示，导管 A 亚群中层粘连蛋白表达上调；配体-受体分析进一步发现 LAMC2 是导管细胞亚群中的一个关键靶基因，同时由 TGFB1 和 FGF2 受体介导的成纤维-炎症反应亦被揭示。层粘连蛋白上调仅出现于 dCCA 中，在 CP 中未观察到；而 TGFB1 和 FGF2 受体驱动的信号转导则是 CP 和 dCCA 导管细胞共有的特征。

研究显示，在 dCCA 中发现了一个新的导管细胞群，与正常胰腺和 CP 相比，该细胞群表现出层粘连蛋白上调。此外，dCCA 细胞外基质中配体、受体和靶基因的表达凸显出 TGFB1-FGF2-LAMC2 轴可能参与了 dCCA 肿瘤中促纤维增生过程的形成。

癌症相关成纤维细胞（CAF）是肿瘤微环境的主要组成部分，通常被认为具有促进肿瘤生长的功能。然而，近期研究表明 CAF 也可能抑制肿瘤的生长和进展。本研究旨在识别在胆道癌中发挥抑制作用的 CAF 并阐明其机制。

该研究回顾性评估了 1996 年至 2017 年在本院接受手术治疗的 114 例胰腺导管癌（PDAC）和 154 例胆道癌（BTC）患者中α-平滑肌肌动蛋白（αSMA）在 CAF 中的表达。从手术切除标本中分离胆道癌细胞系、胰腺导管癌细胞系以及 CAF，用于评估癌细胞的增殖能力。收集 CAF 的条件培养基（CM-CAF）进行试验。采用蛋白芯片分析条件培养基中的关键因子，以鉴定介导细胞生长抑制的候选分子。

在 PDAC 患者中，αSMA 阳性表达者的总生存期和无复发生存期显著短于 αSMA 阴性患者（p 值分别为 0.003 和 0.009）。相反，在 BTC 患者中，αSMA 阳性表达者的无复发生存期优于 αSMA 阴性患者（p = 0.03）。CM-CAF 仅能抑制 BTC 癌细胞系的增殖，而对 PDAC 细胞系无抑制作用。蛋白芯片分析结果显示，IL-6 和 IL-8 是抑制 BTC 癌细胞增殖的关键因子。中和 IL-6 和 IL-8 后，CM-CAF 对 BTC 细胞的抑制作用被消除。

结果显示，CAF 是 BTC 的有利预后因素，但在 PDAC 中则不然。研究证实了 BTC 中存在具有肿瘤抑制作用的 CAF，其通过分泌 IL-6 和 IL-8 发挥抗增殖效应。这些发现提示，在 BTC 的肿瘤微环境中，CAF 是一种新型的、依赖于背景环境的角色。