Best of ASH丨menin抑制剂可显著增强CAR-T细胞疗法对NPM1m/KMT2ArAML的疗效

抑制 menin-KMT2A复合物的药物已成为治疗 KMT2Ar白血病的极具前景的新策略。此前研究发现，NPM1m AML 同样依赖 menin 与野生型 KMT2A 的相互作用，而menin 抑制剂能够抑制由 MEIS1 驱动的白血病基因表达程序，从而诱导分化（Kühn 等，Cancer Discovery 2016）。早期临床试验在大量既往治疗失败的患者中显示出显著疗效，促进 Menin 抑制剂 revumenib 获得 FDA 批准用于复发/难治（R/R） KMT2A-r 急性白血病，并于最近获批用于治疗R/R  NPM1m AML。

本研究中，研究者发现menin抑制剂可在 KMT2A-r 和 NPM1m 两类白血病中诱导免疫靶点 CLEC12A（也称为 CLL-1）的表达，从而使细胞对嵌合抗原受体（CAR）免疫治疗更加敏感。

首先，RNA 测序显示，在使用不同的menin抑制剂（包括 MI-503、ziftomenib 以及 VTP-50469[revumenib 的近似同源物]）后，KMT2Ar 和 NPM1m AML 细胞中的 CLEC12A 均稳定上调。这些转录水平的变化在流式细胞术（FC）检测中体现为蛋白表面表达增强，并在来自 NPM1m 患者的原代样本中得到验证。

虽然 ChIP-seq 证据显示 menin 或 KMT2A 并不直接结合 CLEC12A，但对 CD11b 等多种分化标志物的流式检测提示，CLEC12A 的诱导可能与早期单核系分化相关。

为评估menin抑制剂作为 CLEC12A 靶向 CAR 免疫治疗的 AML“预处理”策略，研究者首先考察了menin抑制剂对免疫效应细胞功能的影响。结果显示：在极高浓度长期作用（21 天）下，T 细胞增殖仅轻度受损，而 NK 细胞数量则有中等程度扩增。menin抑制剂不会显著影响未转导 T 或 NK 细胞的杀伤效应，也未见多种衰竭标志物（如 PD-1、TIM-3、LAG-3、TIGIT）表达明显变化；T 和 NK 细胞的 IFN-γ 反应亦未受损。单细胞 RNA 测序显示，menin抑制剂处理 4 天后，相较于对照组，免疫细胞比例无显著差异。

由于上述结果表明 menin抑制剂不会负面影响免疫效应细胞功能，研究者进一步构建了含 4-1BB.CD3ζ 刺激结构域的 CLEC12A 靶向 CAR-T 和 CAR-NK 细胞，并证实其可在体外有效杀伤 CLEC12A 阳性的靶细胞。

在联合治疗评估中，研究者首先将 NPM1m OCI-AML3 细胞以 menin抑制剂处理 4 天，再加入 CAR-T 或 CAR-NK 细胞（不同效靶比）。结果显示，menin抑制剂联合 CLEC12A 靶向 CAR 治疗的抗白血病活性明显优于任一单药治疗，且在多个供体来源的细胞中表现一致。值得注意的是，在一个适应性实验模型中，即使是对 menin抑制剂产生耐药的 NPM1m OCI-AML3 细胞在持续menin抑制剂处理下保持高表达 CLEC12A，CAR-T 依然展现出良好的杀伤效应。在原代 NPM1m AML 样本中，经过 6 天的menin抑制剂处理后，联合治疗在一半的样本中也表现出优于单药的抗白血病活性。

这是首个确证menin抑制剂能诱导免疫靶点 CLEC12A，从而克服CAR-T/NK细胞治疗在 AML 中局限性的前临床研究。menin抑制剂联合 CLEC12A 靶向 CAR-T 的方案在体内外均展现出显著抗白血病效应，值得尽快进入临床研究。